創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒
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特點:
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果
產(chǎn)品名稱 | 創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Vibrio vulnificus |
規(guī)格 | 50次 |
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或-20℃
注意事項:
建議加樣順序是陰性質控品、待檢樣本、陽性質控品。4. PCR擴增(擴增區(qū))
1) 儀器設置(以ABI Prism 7500為例)
將PCR反應管放入PCR儀內(nèi),按照對應順序設置陰性質控品(NTC)、陽性質控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM,Quencher Dye為None,參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ) 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號,反應體系為25 μl。
特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
7-乙基-10羥基喜樹堿 86639-52-3 檢測用對照品 無
葫蔓藤鉤吻 Gelsemium elegans (Gardn. et Champ.) Benth. 鉤吻素子 1358-76-5 C20H22N2O ≥98% 稀土合金成分分析標準物質(G02 51
對照品磺酸右丙氧芬100829-200501HPLC法含量測定
Pyrethrum Exact除蟲菊提取物標準品100mg除蟲菊提取物標準品
鐵皮石斛Dendrobium officinale Dendrobine 石斛堿 2115-91-5
山藥 Chinese yam 2g
芍藥苷Paeoniflorin3180-27-620mg
Pachypodol PACHYPODOL 33708-72-4
HPLC法含量測定門冬安酸鳥安酸140749-2007012-8℃,避光50mg
澤瀉醇 A;Alisol A 19885-10-0 20mg 訂購|咨詢
25389-94-0 流卡那霉素標準品 200mg
甜菜減;甘安醋三胺內(nèi)鹽Glycinepetaine;imetxylamineinnersalt107-43-7HPLC≥98%,20mg/支
Oxychelerythrine 氧基屈菜季銨減 28342-33-8
Levalberol xy7nochloride 左沙丁胺醇鹽酸鹽標準品50293-90-8 200mg
7-羥基-5,8-二甲氧基黃烷酮 54377-24-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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公司即用型PCR試劑盒:
創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。