黃曲霉毒素總量（Aflatoxins Total）ELISA檢測(cè)試劑盒上海滬崢現(xiàn)貨供應(yīng)，全國(guó)免費(fèi)快遞運(yùn)輸，質(zhì)量保證！試劑盒檢測(cè)樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度高，歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)

黃曲霉毒素總量（Aflatoxins Total）ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品詳細(xì)說(shuō)明：

規(guī)格：96T

一、原理

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法定量檢測(cè)樣品中黃曲霉毒素的殘留量。

二、適用范圍

定量檢測(cè)玉米、花生、飼料、食用油等樣品中黃曲霉毒素的殘留。

三、試劑盒特點(diǎn)及技術(shù)指標(biāo)

* 檢 測(cè) 時(shí) 間 ： 30 min

  試劑盒靈敏度： 0.1 ppb(μg/kg)

* 試劑盒檢測(cè)純陰性樣本的背景值＜1 ppb

酶標(biāo)免疫測(cè)定程序

①     將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，待其完全回  升至室溫（20～25℃）后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

②  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。

③  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50μL

到對(duì)應(yīng)的微孔中，加入黃曲霉毒素總量酶標(biāo)物50 μL /孔，再加入黃曲霉毒素總量抗體50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20 min。

④     洗板：小心揭開(kāi)蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，加入洗滌工作液250 μL/孔，每次靜置20 s，甩去孔內(nèi)液體，重復(fù)洗滌3次，*一次用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。

⑤  顯色：加入底物液A液50 μL/孔，再加底物   

液B液50 μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10 min。

⑥     測(cè)定：加入終止液50 μL/孔，用酶標(biāo)儀立即  測(cè)定450 nm處的吸光度值（建議用雙波長(zhǎng)450/630 nm）檢測(cè)。

七、 結(jié)果判定

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以黃曲霉毒素總量標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ppb）的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中黃曲霉毒素總量實(shí)際濃度。（詳見(jiàn)試劑盒專(zhuān)業(yè)分析軟件，以便進(jìn)行大量樣本的分析計(jì)算。）

樣本處理及要求

1.  血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2.  血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。  

3.  尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。  

4.  細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5.  組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6.  標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

 7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

嘔吐毒素（Deoxynivalenol）ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)：

① 洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

② 反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

③ 不使用過(guò)了有效期的試劑盒，不交換使用不同批號(hào)的試劑。

④ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。

⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時(shí)間為15～20min即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到30min，反之則減短反應(yīng)時(shí)間。

貯藏條件： 2～8℃