雪腐鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒
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以下是PCR鑒定試劑盒訂購信息:
產(chǎn)品名稱:雪腐鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Fusarium nivale
產(chǎn)品規(guī)格:50次
運輸:低溫
保存:負20度
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨
雪腐鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒特點優(yōu)勢:
1. 特異性:
2. 重現(xiàn)性:
3. 靈敏性:
4. 實用性:
具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 RNA 模板。
2. 兩管式 RT-PCR,一次 RT 反應產(chǎn)物可以作為多次 PCR 的模板。本試劑盒提供 10 次的 RT 反應試劑和 50 次的 PCR 試劑。
3. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性高,引物是根據(jù)基因的保守區(qū)域設計,適用于所有強、中、弱新城疫毒株,產(chǎn)物長度為 421 bp。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
水紅木Viburnum cylindricum 4',9,9'-ixy7noxy-3'-metxoxy- 3,7'-epoxy-4,8'-oxyneolignan none 144881-21-0 C19H22O6 ≥95%
異綠原醋CCISOchlorogqnicccid20mg/支
金絲桃苷;槲皮素-3-半乳糖苷 Hyperoside 482-36-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品多西環(huán)素0485-9901含量測定
錄化天竺葵素 Di-te-octyl Disulfide 2995
千金藤Stephania japonica 16-Oxoprometaphanine 16-氧代原間千金藤堿 58738-31-1 C20H23NO6 ≥97%
華毒基CinobufcginHPLC≥98%;20mg/支
射干 Belamcanda chinensis (L.) DC Tectoridin 射干苷 611-40-5 C22H22O11 N-甲基派嗪(100141
中藥對照藥材兔耳草121242-200401TLC法鑒別
Isochlorogenic acid C(4,5')4,5-二加非??鼘幩岫龋骸?/span>97%
血竭(麒麟竭) Dragon's blood(Daemonorops draco) 0.1g
佩蘭隊照藥材Perrinconolmedicine1g
Cleroindicin F (3AR,7AR)-3,3A,7,7A-四輕-3A-輕基-6(2H)-本并同 189264-47-9
Isopropyl Palmitate棕櫚酸異丙酯標準品142-91-6 500mg棕櫚酸異丙酯標準品
氧化苦參堿;Ammothamnine 16837-52-8 20mg 訂購|咨詢
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操作流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。