產(chǎn)品介紹：
【規(guī)格】：96T/48T
【類別】：一檔（常規(guī)實(shí)驗(yàn)）；二擋（高精準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)）
【種屬】：可提供各類種屬標(biāo)本課題
【保存】：-20℃（較長時(shí)間不用時(shí)）；2-8℃（頻繁使用時(shí)）
【保質(zhì)期】：6個(gè)月。
【實(shí)驗(yàn)原理】
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1、酶聯(lián)板：一塊（96孔；48孔）
2、標(biāo)準(zhǔn)品：2瓶
3、樣品稀釋液：1×20ml/瓶
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液：1×10ml/瓶
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液：1×10ml/瓶
6、生物素標(biāo)記抗體：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液：1×10ml/瓶
9、濃洗滌液：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液：1×10ml/瓶
【實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制】
1、儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2、洗液的配制：按比例配制洗液備用。
【樣品收集、處理及保存】
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清：
適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2、細(xì)胞：
用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3、血清：
在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4、血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5、體液：
包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6、組織標(biāo)本：
切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000rmp離心20分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7、保存：
如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。