實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

生活飲用水中氟 200mL 轉(zhuǎn)基因元件泛素基因啟動子PCR試劑盒

生活飲用水中鈣、鎂 200mL 轉(zhuǎn)基因元件泛素基因啟動子染料法qPCR試劑盒

生活飲用水中總硬度、氯化物 50mL 轉(zhuǎn)基因元件泛素基因啟動子探針法qPCR試劑盒

白酒中鉛 100mL 轉(zhuǎn)基因元件小麥熱激蛋白基因終止子LAMP試劑盒

白酒中乙醇濃度 500mL 轉(zhuǎn)基因元件小麥熱激蛋白基因終止子PCR試劑盒

白酒中鄰苯二甲酸二異丁酯DIBP、鄰苯二甲酸二丁酯DBP、鄰苯二甲酸二4 50mL 轉(zhuǎn)基因元件小麥熱激蛋白基因終止子染料法qPCR試劑盒

白酒中乙酸乙酯、己酸乙酯 50mL 轉(zhuǎn)基因元件小麥熱激蛋白基因終止子探針法qPCR試劑盒

白酒中錳 100mL Abalone Herpes-like Virus(AbHV)鮑樣病毒PCR試劑盒

白酒中總酸、總酯 500mL Abalone Herpes-like Virus(AbHV)鮑樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

白酒中酒精度、甲醇 500mL Abalone Herpes-like Virus(AbHV)鮑樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

白酒中香型鑒定(清香型/老白干香型/醬香型/芝麻香型/濃香型 可選) 50mL Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus(AbSV)鮑癥病毒PCR試劑盒

食用油中飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸 20mL Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus(AbSV)鮑癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

肉糜中貂源性成分（定性） 10g Abalone Shriveling Syndrome-associated Virus(AbSV)鮑癥病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

肉糜中狐貍源性成分（定性） 10g Abalone Spherical Virus鮑球狀病毒PCR試劑盒

肉糜中貓源性成分（定性） 10g Abalone Spherical Virus鮑球狀病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
香薷探針法PCR鑒定試劑盒圖片

"中國倉鼠肺細胞;CHL請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

Phospho-MSK1 (Ser360)  磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體規(guī)格： 0.1ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

Phospho-MSK1 (Ser212)  磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體規(guī)格： 0.1ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

Phospho-MSK1 (Ser376)  磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體規(guī)格： 0.1ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

Phospho-MSK1 (Thr581)  磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體規(guī)格： 0.1ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

MST1  蛋白激酶MST抗體規(guī)格： 0.2ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

DDR2 Others Mouse 小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) 請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

人真皮成纖維細胞-總RNAHDF-a NA請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞"

"小鼠小腦星形膠質(zhì)細胞(MA-c)(5×105)請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP 小鼠虹膜色素上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細胞系 Human請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

中國倉鼠肺細胞;CHL請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶RAB-s008

Integrin alpha 3/CD49c  整合素α3抗體規(guī)格： 0.1ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

Integrin Alpha 3 + Beta 1  整合素α3β1抗體規(guī)格： 0.2ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

Integrin beta 5  整合素β5抗體規(guī)格： 0.1ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞

Integrin alpha 1/CD49a  整合素α1抗體規(guī)格： 0.1ml請詢價5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶原代細胞"