注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品名稱：威靈仙探針法PCR鑒定試劑盒圖片

英文名稱：Radix clematidis  

產(chǎn)品分類：PCR鑒定試劑盒

產(chǎn)品編號(hào)：EY00P2729

產(chǎn)品規(guī)格：50次
運(yùn)輸：低溫

保存：負(fù)20度

有效期：一年

貨期：2-3周

產(chǎn)品及特點(diǎn)

CP4-EPSPS 是從土壤農(nóng)桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因，是轉(zhuǎn)

基因植物研究中最為常用的一種篩選標(biāo)記基因，因此本公司根據(jù)探針法 qPCR 原理開發(fā)了專門用于檢測(cè) CP4-EPSPS 的試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板。

2. 根據(jù) CP4-EPSPS 保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物和探針，能專一性地檢測(cè)出樣品中的

CP4-EPSPS 成分，但不能檢測(cè)其他非 CP4-EPSPS 成分。

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 一管式閉管操作，降低了交叉污染。

5. 快速，整個(gè)檢測(cè)過程（按一個(gè)樣品計(jì)）所需時(shí)間僅為 2.0 小時(shí)。

6. 本只能用于科研，足夠 50 次 20uL 體系的探針法熒光定量 PCR。

使用方法 
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照（用第一步稀釋得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線系列稀釋液的第 4 號(hào)做模板）。
凍干粉中副溶血性弧菌（陽性） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tE9 PCR試劑盒

凍干粉中志賀氏菌（陽性） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tE9染料法熒光定量PCR試劑盒

乳粉中沙門氏菌（陽性） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tE9探針法熒光定量PCR試劑盒

凍干粉中沙門氏菌（陽性） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tg7 LAMP試劑盒

乳粉中金黃色葡萄球菌（定量） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tg7 PCR試劑盒

凍干粉中金黃色葡萄球菌（定量） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tg7染料法熒光定量PCR試劑盒

凍干粉中金黃色葡萄球菌（陽性） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tg7探針法熒光定量PCR試劑盒

凍干粉中糞大腸菌群（定量） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tml3終止子LAMP試劑盒

凍干粉中大腸埃希氏菌（定量） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tml3終止子PCR試劑盒

乳粉中大腸菌群（定量） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tml3終止子染料法qPCR試劑盒

凍干粉中大腸菌群（定量） 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tml3終止子探針法qPCR試劑盒

乳粉中菌落總數(shù) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tOCS LAMP試劑盒

凍干粉中菌落總數(shù) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tOCS PCR試劑盒

生活飲用水中pH值 100mL 轉(zhuǎn)基因元件tOCS染料法熒光定量PCR試劑盒

生活飲用水中鎘 100mL 轉(zhuǎn)基因元件tOCS探針法熒光定量PCR試劑盒
威靈仙探針法PCR鑒定試劑盒圖片

"IL12B Others Rat 大鼠 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

KG-1細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠子細(xì)胞,U14細(xì)胞 滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基SM-prf請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

NCI-H1688(人典型小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)  磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體規(guī)格： 0.1ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)  磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體規(guī)格： 0.1ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740)  磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體規(guī)格： 0.1ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)  磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體規(guī)格： 0.1ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系"

"Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)  磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體規(guī)格： 0.1ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

CRIP2 Others Human 人 CRIP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

mCF, 小鼠*成纖維細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞，7F2細(xì)胞 EL4. IL-2(細(xì)胞)請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

原代系膜細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

CaMK2 beta  鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗體規(guī)格： 0.1ml請(qǐng)?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系"

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。