技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

亞氨基二乙(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥98%

DL乳鋰(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥98%  

堿式碳鎂五水(>98%,BC)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BC純度：≥98%  

二氧化錳(>97.5%,BC)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>97.5%,BC純度：≥98%

1,3二基脲(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥94%  

聚乙二600   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：BR純度：≥98%  

普魯士蘭(>98%,BS)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BS純度：≥95%  

派洛寧B(Ind)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>30%,Ind Grade純度：98%

5溴43吲哚基N乙酰betaD氨基半乳糖苷   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：分子生物學(xué)級純度：≥98%

巖藻黃質(zhì)；褐藻素   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：BR,UV>30%純度：≥95%

Brij 58   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：BR純度：≥97%  

二代乙酰(>98%,BR)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥98%  

脫氧核糖核酶 II   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：分子生物學(xué)級純度：≥98%  

高粘度羥乙基纖維素   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：38000~42000 mpa.s純度：≥98%  

L天冬氨鈉一水   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%，BR純度：≥98%  

鉛屑(>99%，5N)   進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%，5N純度：≥95%  

CRHR2  促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2一抗    特價促銷 0.1ml Tolazoline HCl

CHX10  CHX10蛋白一抗    特價促銷 0.1ml Tolterodine Tartrate

Glycophorin C/CD236  糖蛋白C一抗    特價促銷 0.1ml Tolterodine Tartrate

Frizzled 2  Wnt信號受體FZD2蛋白一抗    特價促銷 0.1ml Topiramate

IHH  HHG2一抗    特價促銷 0.2ml Topiramate

Insig2  誘導(dǎo)基因2一抗    特價促銷 0.1ml Tozasertib，VX680/MK0457

MCHR/GPR24  G蛋白偶聯(lián)受體24一抗    特價促銷 0.1ml Trospium chloride

PSMC1/Proteasome 19S S4   26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型一抗    特價促銷 0.1ml AG014699

中性內(nèi)肽酶/腦啡肽酶Elisa檢測試劑盒 英文名稱： NEP ELISA Kit 英文縮寫： NEP

中性粒細(xì)胞趨化蛋白2Elisa檢測試劑盒 英文名稱： NAP-2/CXCL7 ELISA Kit 英文縮寫： NAP-2/CXCL7

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白Elisa檢測試劑盒 英文名稱： NGAL ELISA Kit 英文縮寫： NGAL

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白Elisa檢測試劑盒 英文名稱： Lipocalin-2/NGAL ELISA Kit 英文縮寫： Lipocalin-2/NGAL

中性粒細(xì)胞顆?？贵wElisa檢測試劑盒 英文名稱： ANGA ELISA Kit 英文縮寫： ANGA

中性粒細(xì)胞抗體Elisa檢測試劑盒 英文名稱： ANA ELISA Kit 英文縮寫： ANA

中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶Elisa檢測試劑盒 英文名稱： NAP ELISA Kit 英文縮寫： NAP

中性粒細(xì)胞防御素3Elisa檢測試劑盒 英文名稱： DEFA3 ELISA Kit 英文縮寫： DEFA3

莪術(shù)探針法PCR鑒定試劑盒價格

組織蛋白酶HElisa檢測試劑盒英文名稱：CTSH ELISA Kit英文縮寫：CTSH

關(guān)聯(lián)鈣信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子2Elisa檢測試劑盒英文名稱：TACSTD2 ELISA Kit英文縮寫：TACSTD2

蛋白p53Elisa檢測試劑盒英文名稱：TP53 ELISA Kit英文縮寫：TP53