技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

Human Staphylococal protein A,SPA ELISA試劑盒Estradiol Valeate>98%,BR

Human staphylococcus aureus enterotoxins,SE ELISA試劑盒Estradiol Valeate>98%,BR

Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA試劑盒 Estradiol Valeate>98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定

Human Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA試劑盒 Etidronate disodiumBR

Human steroid producing cell autoantibody,SCA ELISA試劑盒Etidronate disodiumBR

Human Streptokinase,SK ELISA試劑盒Etidronate disodiumBR

Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA試劑盒Etidronate disodiumBR

Human Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA試劑盒Etodolac>98.5%,BR

Human Stromelysin-1,ST1 ELISA試劑盒Etodolac>98.5%,BR

Human Stromelysin-2,ST2 ELISA試劑盒Etodolac>98.5%,BR

Human Stromelysin-3,ST3 ELISA試劑盒EtodolacHPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Human substance P receptor,SP-R ELISA試劑盒Etonogestrel>98%

"4-(溴?；?吡啶鹽5349-17-74-(溴?；?吡啶鹽5349-17-7

2-氟-5-三氟基胺535-52-42-氟-5-三氟基胺535-52-4

(S)-3-羥基酸酯53562-86-0(S)-3-羥基酸酯53562-86-0

2-噻吩-5-磺酰胺53595-66-72-噻吩-5-磺酰胺53595-66-7

4-基磺酰芐溴53606-06-74-基磺酰芐溴53606-06-7

alpha-溴代-4-536-38-9alpha-溴代-4-536-38-9

2-溴-3-基酸53663-39-12-溴-3-基酸53663-39-1

4-異基酸536-66-34-異基酸536-66-3

3-氨基-5-吡醇53666-79-83-氨基-5-吡醇53666-79-8

3-基吡啶536-78-73-基吡啶536-78-7

4-環(huán)基-4-氧代酸,95%53712-75-74-環(huán)基-4-氧代酸,95%53712-75-7

7-溴-1H-吲53857-58-27-溴-1H-吲53857-58-2"

Human sulfatide,SFT ELISA試劑盒Etonogestrel>98%

Human Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA試劑盒Everolimus;RAD001>95%,mTOR抑制劑,BR

Human Surface Membrane Immunoglobulin,SmIg ELISA試劑盒Everolimus;RAD001>95%,mTOR抑制劑,BR
椿皮染料法PCR鑒定試劑盒價(jià)格ARSIGeneRuler™ High Range DNA Ladder50 μg小鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)免疫試劑盒

ART1GeneRuler™ High Range DNA Ladder5x50 μg小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)免疫試劑盒

ARVCFGeneRuler™ High Range DNA Ladder, ready-to-use50 μg小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)免疫試劑盒

ALDH1ZipRuler™ Express DNA Ladder Set, ready-to-use2x50 μg小鼠花生四烯酸12 - 脂氧合酶,12S型(Alox12/Alox12p)免疫試劑盒

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser80)NoLimits™ 15 bp DNA Fragment10 μg小鼠花生四烯酸(AA)免疫試劑盒

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263)NoLimits™ 10 bp DNA Fragment10 μg小鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)免疫試劑盒

phospho-ABCA1 (Ser2054)NoLimits™ 20 bp DNA Fragment10 μg小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)免疫試劑盒

phospho-Aconitase 1 (Ser138)NoLimits™ 35 bp DNA Fragment10 μg小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)免疫試劑盒