抗體的生物素化標記實驗要點：

1.如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合；

7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

英文名稱 Anti-SKALP/Elafin  

中文名稱 彈性蛋白酶抑制劑抗體  

別    名  ELAF_HUMAN; Elafin; Elastase Specific Inhibitor; Elastase-specific inhibitor; ES 1; ESI; Peptidase inhibitor 3; PI 3; PI-3; PI3; Protease inhibitor 3 skin derived; Protease inhibitor WAP3; SKALP; Skin derived Anti leukoproteinase; Skin-derived antileukoproteinase; Trappin 2; WAP four disulfide core domain protein 14; WAP four-disulfide core domain protein 14; WFDC14.

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Dog, Horse

產品類型  一抗    

研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導 細菌及 腫瘤細胞生物標志物  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 13kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human SKALP/Elafin

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復）

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

多克隆抗體制備：

我公司合成抗原，保證陽性血清和抗體ELISA效價達到1：32000，由蛋白抗原制備的多抗，保證WB檢測結果是陽性。技術服務實行分步報價，按節(jié)點收費，為客戶節(jié)約成本。

單克隆抗體制備:

客戶可根據項目實際需求情況靈活選擇進行，我公司將為您的項目提供專業(yè)的建議。在制備過程中，與客戶互動驗證，確保最終制備的抗體ELISA陽性血清檢測達到合同要求的同時，也能滿足客戶抗體最終應用驗證需求。技術服務實行分步報價，按節(jié)點收費，為客戶節(jié)約成本。

重組抗體表達服務:

重組抗體技術使制備人源化抗體和人源抗體成為可能，而這是其他常規(guī)的多克隆或單克隆抗體制備方法無法做到的。我公司已搭建好的抗體測序、重組抗體表達等先進平臺，能為客戶提供各種類型的重組抗體表達服務，包含鼠源單克隆抗體構建及表達、更換恒定區(qū)亞型的嵌合抗體表達，抗體人源化改造及表達等服務。

單項免疫學及檢測服務:

我公司也為客戶提供單項免疫學和檢測服務，如動物免疫、動物飼養(yǎng)、抗體修飾服務（如生物素，FITC，HRP等的標記）、以及ELISA，WB，IHC，DB等檢測服務。

抗體定制服務:

已注冊商標，主要用于抗體藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)，是我公司針對有特定應用要求和各種模型測試的高端客戶量身定制的專業(yè)服務，主要面向工業(yè)客戶。

實驗原理 :

（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 

（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 

（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 

（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動

免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 

（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 

（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。

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