抗體的生物素化標(biāo)記實驗要點：

1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

英文名稱 Anti-ROR beta  

中文名稱 維甲酸相關(guān)孤兒受體β抗體  

別    名  bA133M9.1; NR1F2; Nuclear receptor ROR-beta; Nuclear receptor RZR beta; Nuclear receptor RZR-beta; Nuclear receptor subfamily 1 group F member 2; OTTHUMP00000021486; RAR related orphan receptor B; RAR related orphan receptor beta; Retinoic acid binding receptor beta; Retinoid-related orphan receptor-beta; ROR BETA; Rorb; RORB_HUMAN; RZR BETA; RZRB.  

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep  

產(chǎn)品類型  一抗    

研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化 表觀遺傳學(xué)  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 53kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human RORB

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復(fù)）

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

多克隆抗體制備：

我公司合成抗原，保證陽性血清和抗體ELISA效價達(dá)到1：32000，由蛋白抗原制備的多抗，保證WB檢測結(jié)果是陽性。技術(shù)服務(wù)實行分步報價，按節(jié)點收費，為客戶節(jié)約成本。

單克隆抗體制備:

客戶可根據(jù)項目實際需求情況靈活選擇進(jìn)行，我公司將為您的項目提供專業(yè)的建議。在制備過程中，與客戶互動驗證，確保最終制備的抗體ELISA陽性血清檢測達(dá)到合同要求的同時，也能滿足客戶抗體最終應(yīng)用驗證需求。技術(shù)服務(wù)實行分步報價，按節(jié)點收費，為客戶節(jié)約成本。

重組抗體表達(dá)服務(wù):

重組抗體技術(shù)使制備人源化抗體和人源抗體成為可能，而這是其他常規(guī)的多克隆或單克隆抗體制備方法無法做到的。我公司已搭建好的抗體測序、重組抗體表達(dá)等先進(jìn)平臺，能為客戶提供各種類型的重組抗體表達(dá)服務(wù)，包含鼠源單克隆抗體構(gòu)建及表達(dá)、更換恒定區(qū)亞型的嵌合抗體表達(dá)，抗體人源化改造及表達(dá)等服務(wù)。

單項免疫學(xué)及檢測服務(wù):

我公司也為客戶提供單項免疫學(xué)和檢測服務(wù)，如動物免疫、動物飼養(yǎng)、抗體修飾服務(wù)（如生物素，FITC，HRP等的標(biāo)記）、以及ELISA，WB，IHC，DB等檢測服務(wù)。

抗體定制服務(wù):

已注冊商標(biāo)，主要用于抗體藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)，是我公司針對有特定應(yīng)用要求和各種模型測試的高端客戶量身定制的專業(yè)服務(wù)，主要面向工業(yè)客戶。

實驗原理 :

（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 

（2）活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。 

（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。 

（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動

免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 

（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 

（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。

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