上海滬崢生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品, PCR檢測(cè)試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)
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上海市奉賢區(qū)
主營(yíng)產(chǎn)品
ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品, PCR檢測(cè)試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
- 植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)
描 述
直接使用種子裂解液作為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,無(wú)需單獨(dú)抽提DNA,快速,靈敏度高,適合快速大規(guī)?;驒z測(cè)。
增加了UNG防污染體系,杜絕假陽(yáng)性;試劑盒包含裂解液/PCR Mix
植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系說(shuō)明書(shū)價(jià)格優(yōu)惠
快速的從植物(如:水稻、小麥、煙草、玉米、大豆、油菜、棉花等)的種子樣本中釋放出基因組 DNA,直接用于 PCR 反應(yīng),并采用UNG防PCR產(chǎn)物污染體系,因此特別適合大規(guī)模基因檢測(cè)。? 無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)而昂貴的 DNA 純化。
樣品需求量小,只需取單粒種子即可。
無(wú)需研磨、破碎等特殊處理,操作簡(jiǎn)便。
防污染 PCR 體系 2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG),有效消除由 PCR 產(chǎn)物所引起的污染,保證擴(kuò)增的
特異性和準(zhǔn)確性。
植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)
產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品采用獨(dú)特的裂解反應(yīng)體系,能夠快速的從植物(如:水稻、小麥、煙草、玉米、大豆、油菜、棉花等)的種子樣本中釋放出基因組 DNA,用于 PCR 反應(yīng),因此特別適合大規(guī)?;驒z測(cè)。為了滿足不同檢測(cè)試驗(yàn)的需要,本試劑盒可以使用多種類型的樣本(如完整種子、微量組織切塊或多顆種子的磨碎樣本)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。其中,對(duì)于還需要進(jìn)行萌發(fā)的種子樣本,可以選擇切取種胚以外的微量組織切塊(1-5mg)進(jìn)行實(shí)驗(yàn);對(duì)于需要在大量樣本中進(jìn)行抽樣檢測(cè)的實(shí)驗(yàn),可以選擇將多個(gè)樣本混合并磨碎成直徑0.5mm 左右的顆粒后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(*可以檢測(cè)出
0.1%的目的樣本)。
裂解反應(yīng)體系釋放基因組 DNA 過(guò)程可以在 5-10min 內(nèi)完成,不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產(chǎn)物的過(guò)程,即可將釋放出的微量 DNA 作為模板進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。
2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎(chǔ)上用 dUTP 替代了 dTTP,并同時(shí)加入能夠降解含有 dUTP 模板的
UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR 反應(yīng)前,利用 UNG 酶降解含有尿嘧啶的 PCR 產(chǎn)物,UNG 酶對(duì)不含有尿嘧啶的模板不會(huì)造成任何影響,從而保證擴(kuò)增的特異性和準(zhǔn)確性,防止了大規(guī)?;驒z測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)的 PCR 產(chǎn)物污染問(wèn)題。
D-Taq DNA polymerase 是 Foregene 為直接PCR反應(yīng)專門研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase 對(duì)多種 PCR 反應(yīng)抑制劑具有極強(qiáng)的的耐受性、在各種復(fù)雜反應(yīng)體系中均能高效擴(kuò)增痕量的 DNA,擴(kuò)增速度可達(dá) 2Kb/min,特別適合進(jìn)行直接 PCR反應(yīng)。
植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)
試劑盒內(nèi)容
Part I (Store at R.T. or 4°C)
Buffer SP1:提供植物種子裂解反應(yīng)所需的環(huán)境。
Buffer SP2:中和裂解產(chǎn)物,使其不影響后續(xù) PCR 反應(yīng)。
6× DNA Loading Buffer:該 Loading Buffer 中不含有 SDS。建議在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí),配搭使用試劑盒附贈(zèng)的
6× DNA Loading Buffer,以便取得好的電泳結(jié)果。切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer,否則在電泳時(shí)會(huì)在泳時(shí)會(huì)在泳道中有一大團(tuán)拖尾
亮光,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
Part II (Store at -20°C)
2× Seed PCR EasyTM (UNG):在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎(chǔ)上用 dUTP替代了 dTTP,并同時(shí)加入能夠降解含有 dUTP 模板的
UNG 酶,從而能夠有效防止 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物污染。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系說(shuō)明書(shū)價(jià)格優(yōu)惠試劑盒應(yīng)用
適用范圍:多種植物種子。 裂解混合液:僅用作 PCR 模板。
試劑盒可用于以下用途:轉(zhuǎn)基因種子鑒定、植物基因分型等。