［產(chǎn)品名稱］魚類白介素1βELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

［英文名稱］IL-1β ELISA Kit

［貨號(hào)］ZK-F6229

［試劑盒保存條件、保質(zhì)期］2-8℃低溫保存下，6個(gè)月的保質(zhì)期。

［運(yùn)輸方式］當(dāng)?shù)乜蛻艨梢杂蓪ｉT配送人員免費(fèi)*貨快遞，外地客戶當(dāng)天下單當(dāng)天免費(fèi)快遞*。

［技術(shù)服務(wù)］凡購(gòu)買子科生物子科生物任何一款ELISA酶聯(lián)免疫分析檢測(cè)試劑盒，都可以享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，外地客戶可以由技術(shù)老師的指導(dǎo)下正確放置好樣本的保存方式后快遞郵寄到我公司技術(shù)部，本地客戶可以享受免費(fèi)上門取樣服務(wù)！

［產(chǎn)品價(jià)格］詳細(xì)價(jià)格可以咨詢?cè)诰€客服年年中促銷中！可電話進(jìn)行詢價(jià)，可以享受7折優(yōu)惠！

魚類白介素1βELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

深圳子科生物提供的ELISA試劑盒產(chǎn)品經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)積累可以檢測(cè)多種標(biāo)本，參數(shù)指標(biāo)齊全，并可提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)分析，我公司并代理各大進(jìn)口原裝試劑盒，提供品牌有：美國(guó)RD、RB、 TSZ、Cloud-clone corp、MP、 Sciencell、Immonoway、ABI，IBL等等，并提供分子生物學(xué)檢測(cè)試劑盒、免疫學(xué)檢測(cè)試劑盒、金標(biāo)法檢測(cè)試劑盒、各品牌原裝進(jìn)口抗體抗原、標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品、細(xì)胞菌株、生物培養(yǎng)基、生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材等等多門類上萬(wàn)種科研產(chǎn)品，歡迎您來(lái)電咨詢！

樣本的采集及保存

一般的生物標(biāo)本包括有：

血液、體液、內(nèi)臟器官、糞便、胃液、活檢組織、組織提取液、天然孔分泌物及各種表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)產(chǎn)物等，一般為無(wú)菌操作，低溫保存(-80℃、液氮)

一．如果采集的實(shí)質(zhì)器官則要求：

1、 器官實(shí)質(zhì)不能太小

2、 以采集實(shí)質(zhì)性病灶區(qū)為佳：如淋巴結(jié)、*、非、肺、脾以及腸管等病毒、病菌聚集的地方為佳

3、 同一病例裝入同一容器，并做好標(biāo)記

4、 應(yīng)在0-8℃的低溫儲(chǔ)存和運(yùn)輸

5、 實(shí)質(zhì)性器官的處理：

5.1、取實(shí)質(zhì)性器官約0.5mg左右，充分剪碎或研磨

5.2、加入約500ul的/生理鹽水，充分混勻

5.3、離心5000rmp x10min，去上清

5.4、-20℃保存，作為待檢標(biāo)本(切勿反復(fù)凍融)

二．體液(常見(jiàn)的包括血清、血漿、唾液以及尿液等)的處理方式

1、血液包括血漿和血清，它們的主要區(qū)別就是：血清凝血而血漿不凝血，所以它們的處理方式也就不一樣

1.1、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽)，采集后立即離心800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

1.2、如要采集血清，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后，800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

2、胃液和唾液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般飯后半小時(shí)內(nèi)不易采集，因?yàn)閯傔M(jìn)食的唾液中富含豐富的唾液淀粉酶，*的采集的時(shí)間時(shí)空腹采集；

3、尿液的采集方式基本和唾液一樣的，即現(xiàn)采現(xiàn)用，但是一般隔夜尿不采集；

4、組織提取液如肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmp x 5min，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

三、糞便以及天然孔排泄物：采集后一般現(xiàn)用/生理鹽水溶解，充分混勻，800-1000rmp x 5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

四、活檢組織一般進(jìn)行穿刺檢測(cè)，最常見(jiàn)的就是肝活檢，像病毒性肝炎、脂肪肝、各種類型的肝硬化等進(jìn)行活檢簡(jiǎn)單方便、準(zhǔn)確。

五、表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)

(一)真核表達(dá)產(chǎn)物

1、 細(xì)胞上清(分泌性蛋白)

1.2、貼壁細(xì)胞或半貼壁，直接將細(xì)胞培養(yǎng)上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；

1.2、不貼壁細(xì)胞，將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmp x10min，吸取上清至另一10ml離心管中，10000rmp x10min， -20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；

2、 細(xì)胞裂解物(非分泌性蛋白)

2.1、貼壁細(xì)胞或半貼壁，直接將細(xì)胞培養(yǎng)上清吸出，然后用001M (pH 7.4)將細(xì)胞吹下至10ml離心管，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管中， DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；

2.2、不貼壁細(xì)胞，將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀移至另一10ml離心管中，0.01M (pH 7.4)重懸，500-800rmp x10min，棄上清，沉淀移至1.5ml離心管中， DDW重懸，置冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmp x10min，取上清， -20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；

(二)原核(大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng))表達(dá)產(chǎn)物

1、表達(dá)上清(非融合性蛋白)

直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmp x10min， 取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；

2、菌體裂解物(融合性蛋白)

直接將培養(yǎng)物和上清吸出，10000rmp x10min，棄上清，沉淀用洗一遍，500-800rmp x10min，棄上清，DDW重懸沉淀，冰水浴中用超聲波裂解儀進(jìn)行裂解，10000rmp x10min，取上清，-20℃或4℃保存，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理；

魚類白介素1βELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書操作步驟

1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。

2. 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。

3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；

4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)

5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對(duì)照孔)

6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)

7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)

8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙徹底拍干；

9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對(duì)照孔)

10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；

11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

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