小鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒說明書上海滬崢供應(yīng)詳細(xì)參數(shù)：

規(guī)格：48T,96T單標(biāo)準(zhǔn)對照可以分別檢測41,89個(gè)樣本。

品牌：滬崢生物

檢測波長：450nm

所需樣本體積：保險(xiǎn)量50ul,實(shí)際上樣10ul具體指標(biāo)請參考說明書

適用范圍：僅供科研課題研究，不得用于臨床診斷。

檢測樣本種類：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細(xì)胞上清液，腦脊液，灌洗液，糞便等樣本.

滬崢供應(yīng)種屬有：大鼠、小鼠、兔、犬、猴、豬牛羊、雞鴨鵝、植物、魚、昆蟲ELISA試劑盒等

試劑盒保存：2-8℃冷藏保存，保質(zhì)期6個(gè)月。

英文名稱：Mouse hydroxyproline,Hyp ELISA kit

小鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒說明書上海滬崢供應(yīng)優(yōu)勢

1、品質(zhì)保障：我司產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等特點(diǎn)，品種齊全，操作簡便，最大限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

2、質(zhì)量可靠：出庫質(zhì)檢把控嚴(yán)格，保障提供給客戶的100%是優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，運(yùn)輸全程跟蹤，公司承諾有任何質(zhì)量問題包退換，誠信經(jīng)營，合作共贏。

3、免費(fèi)代測：公司承諾訂購ELISA試劑盒，享全程技術(shù)指導(dǎo)和免費(fèi)代測服務(wù)，全程有專業(yè)技術(shù)老師負(fù)責(zé)代測，為您分憂。

4、售后無憂：客服立售后服務(wù)中心，24小時(shí)及時(shí)響應(yīng)，真正做到后顧無憂，不斷完善服務(wù)體系。

5、專業(yè)定制：可根據(jù)客戶要求定制種屬，檢測范圍，靈敏度等符合客戶要求的ELISA試劑盒。

小鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒說明書上海滬崢供應(yīng)操作步驟

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。

2.試劑的準(zhǔn)備:

按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。

3.加樣:

在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

4:保溫:

在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

5.洗滌:

洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相。

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