口腔支原體PCR檢測試劑盒產(chǎn)品及特點:具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點,值得信賴的PCR技術(shù)新方法

產(chǎn)品名稱：口腔支原體PCR檢測試劑盒

英文名稱:PCR Detection Kit for Mycoplasma Orale

產(chǎn)品規(guī)格：20T/50T/100T

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

儲存條件】 反應(yīng)試劑盒存于-20 ℃保存，盡量避免反復(fù)凍融。

【有效期】 本試劑盒有效期為十二個月。

口腔支原體PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子*很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

口腔支原體PCR檢測試劑盒注意事項:

1. 試劑盒各組份使用前請充分融化并搖勻,離心管內(nèi)的試劑需離心數(shù)秒后使用。 2 PCR操作各階段應(yīng)在不同實驗室進行。

3 在試劑和標(biāo)本準(zhǔn)備階段使用負(fù)壓超凈臺。

4 應(yīng)穿工作服，戴一次性手套（經(jīng)常替換手套），使用一次性用品。

5 PCR操作人員應(yīng)具有經(jīng)驗和受過培訓(xùn)。

6操作過程中用到的超凈臺、移液器、離心機、擴增儀等儀器設(shè)備應(yīng)經(jīng)常用10%次氯酸或70%乙醇或 紫外燈處理。

7 陽性對照應(yīng)和待檢標(biāo)本平行進行操作后方可進行PCR擴增。

8 使用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請按傳染病實驗室檢查規(guī)程操作。

9本試劑盒僅供科研使用。