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上海滬崢生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對照品, PCR檢測試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細胞
豬藍耳病一步法RT-PCR診斷試劑盒
價格
訂貨量(盒)
¥3.00
≥1
店鋪主推品 熱銷潛力款
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在線客服
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上海滬崢生物科技有限公司
店齡6年
企業(yè)認證
聯(lián)系人
李小姐
聯(lián)系電話
祺祴祹祹祺祵祻祷祲祲祺
經(jīng)營模式
生產(chǎn)商,貿(mào)易商,
所在地區(qū)
上海市奉賢區(qū)
主營產(chǎn)品
ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對照品, PCR檢測試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細胞
- 基本信息
- 用途范圍:科研
- 純度:詳詢客服
- 產(chǎn)地:國產(chǎn)
- 品牌:上海滬崢
- 規(guī)格:20T/50T
- 貨號:HZ-75238
上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售豬藍耳病一步法RT-PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨,我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類齊全,且具有優(yōu)勢價格,歡迎新老客戶咨詢認購。
產(chǎn)品詳細信息
名稱:豬藍耳病一步法RT-PCR診斷試劑盒
規(guī)格: 20T/50T
品牌:上海滬崢
【用途】 用于豬藍耳病的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
【操作步驟】
1.RNA提取
(1) 取疑似豬藍耳病的病料(肺臟、淋巴結(jié)、*、*等)1~4g于無菌研缽,研磨并用Hanks液或PBS稀釋成1:4乳劑,分裝1.5ml滅菌EP管,反復(fù)凍融2~3次,8000r/min離心5分鐘。(血清可直接進行檢測,無需凍融)。
(2)取200uL上清液(或標(biāo)準(zhǔn)品T),移入新的1.5mL滅菌EP管中,加入400uLSR-I,反復(fù)顛倒幾次混勻,室溫放置5~10分鐘。
(3)加入200uL氯仿,漩渦振蕩15秒混勻。室溫下放置2~3分鐘。
(4)12000r/min離心10分鐘,取上層水相(注意:切勿吸取到里兩相之間的雜質(zhì)),轉(zhuǎn)移到一個新的EP管中,再加入等體積異丙醇混勻,室溫放置10分鐘。
(5)12000r/min離心10分鐘,棄去上清,加入SR-II 700uL,充分洗滌沉淀RNA后,12000r/min離心5分鐘,小心吸去上清(注意:嚴(yán)格防止RNA丟失)。
(6)用潔凈吸水紙吸干管壁的SR-II,室溫放置2~3分鐘。用20uLTU-5溶解,即為模板,即用或-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>
3 .PCR操作
4.電泳
稱量0.25g瓊脂糖,放入錐形瓶,加入25mL 1×TAE液(可配置50×濃縮液,儲存?zhèn)溆茫?,于微波爐中熔解,加入1.5uL的TU-8混勻。封閉好電泳槽,加入梳子,倒入瓊脂凝膠,待凝固后,將PCR產(chǎn)物5uL混合1uL TU-7,加樣于凝膠孔中,同時在相鄰孔加3uLTU-6,在120v 電壓下,1×TAE液中電泳15分鐘,在紫外成像儀下觀察結(jié)果。
【結(jié)果判定】
在約440bp位置出現(xiàn)擴增帶,實驗結(jié)果為陽性
豬藍耳病一步法RT-PCR診斷試劑盒
【注意事項】
1. 每次使用,開蓋之前請先瞬時離心,使試劑沉于管底。
2. 所有試劑在要求溫度下保存,-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融,使用后的試劑立即放回,避免在室溫擱置太久。
3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū),避免交叉污染。
4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說明書進行,由于操作失誤、移液器不精確、定時不準(zhǔn)確造成無結(jié)果情況,不予負責(zé)。
5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前,要高壓滅菌,操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁,可用鑷子夾取。
6. 注意防止試劑污染,在有效期限前用完。
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