乙酰膽人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒滬崢供應
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上海滬崢生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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品牌 滬崢
貨號 HS4179
用途范圍 僅用科研
產(chǎn)品規(guī)格 48T/96T
英文名稱 Human Acetylcholinesterase,AChE ELISA kit
產(chǎn)地/廠商 國產(chǎn)
檢測波長 450nm
標記物 HRP標記
檢測范圍 詳見說明書
保存溫度 2-8
商品介紹

乙酰膽人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒滬崢供應以信譽求發(fā)展,以質(zhì)量求生存)

    樣品類型(SAMPLE TYPES): 標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清

或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。

   樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本?/font>

將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。 

  操作步驟:參照說明書靈敏度:具體請查看說明書.檢測范圍(RANGN):具體請查看說明書.

乙酰膽人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒滬崢供應組成及試劑配制 :

1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 

2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。

如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。

4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。

5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。

6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。

7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

4:保溫:

在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會,只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。

5.洗滌:

洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELISA是靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應過程中非特異性地吸附于固相。




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