上海一研生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測(cè)試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學(xué)試劑盒
饒氏無(wú)綠藻PCR檢測(cè)試劑盒
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上海市閔行區(qū)
主營(yíng)產(chǎn)品
反應(yīng)五要素:
饒氏無(wú)綠藻PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
饒氏無(wú)綠藻PCR檢測(cè)試劑盒 | Prototheca zopfiiPCR | 50T |
普通PCR反應(yīng)流程:
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
使用方法 :
1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機(jī)
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項(xiàng):
5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書全文。
5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說(shuō)話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性;整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過(guò)多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。
γ-倒捻子素 訂購(gòu)|咨詢 MMP-7 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
橙黃Ⅳ 訂購(gòu)|咨詢 Synuclein mouse ELISA kit 小鼠突觸素 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
訂購(gòu)|咨詢 Beta2-GP1 IgA/G/M(Human Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 規(guī)格: ;
羅漢果黃素 訂購(gòu)|咨詢 mouse IgG ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgG 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
古倫賓 訂購(gòu)|咨詢 mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgM 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
α-常春藤皂苷 訂購(gòu)|咨詢 mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
五酯素 訂購(gòu)|咨詢 Cath Ab(Human Cathepsin Antibodies) ELISA Kit 人組織蛋白酶抗體 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
蘋果 訂購(gòu)|咨詢 MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
L-組鹽 訂購(gòu)|咨詢 MMP-8 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg
沒(méi)食子酯 訂購(gòu)|咨詢 LF/LTF Ab-Ig(Human Lactoferrin antibody IgG) ELISA kit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg
羅漢果皂苷IVa 訂購(gòu)|咨詢 BPI-Ab(Human anti-Bactericidal permeability increasing protein antibody) ELISA Kit 人抗殺菌通透性增高蛋白抗體 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
扁蓄苷 訂購(gòu)|咨詢 5-NT ELISA Kit 大鼠5核苷酶 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
萊苞迪甙C 訂購(gòu)|咨詢 MPO-ANCA IgG(Human myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG) ELISA kit 人髓過(guò)氧物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
α-香附 訂購(gòu)|咨詢 OPG ELISA Kit 大鼠骨保護(hù)素 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
6-姜 訂購(gòu)|咨詢 BF ELISA Kit 大鼠B因子 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
石吊蘭素 訂購(gòu)|咨詢 PR3 Ab-IgG(Human Anti-proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit 人抗蛋白酶3抗體IgG 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
豆蔻木脂素 訂購(gòu)|咨詢 Alpha-Fodrin IgG/IgA(Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
青陽(yáng)參苷元A 訂購(gòu)|咨詢 OSM ELISA Kit 大鼠抑瘤素M 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
饒氏無(wú)綠藻PCR檢測(cè)試劑盒NIPAL3 NIPA樣蛋白3抗體 Human leucocyte antigen-B27 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
NLGN2 神經(jīng)連接蛋白2抗體 Human glial fibrillary acidic protein ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
MAS1L G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體 Human tartRate-resistant acid phosphatase orm 5b ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
NLGN4X 神經(jīng)元X連鎖蛋白抗體(兒童相關(guān)蛋白) Human CrossLaps ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
NLGN4Y 神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體(兒童相關(guān)蛋白) Human CICP ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
SGPL1 磷酸鞘氨醇裂解酶1抗體 Rat DPD ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
MASH1 神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體 Human DPD ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
GNA12/G protein alpha 12 鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 Human PyriLinks ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝