上海一研生物科技有限公司
主營產品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學試劑盒
展開青霉PCR檢測試劑盒
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準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
產品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
展開青霉PCR檢測試劑盒 | Penicillium patulumPCR | 50T |
普通PCR反應流程:
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
反應五要素:
展開青霉PCR檢測試劑盒參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
5.4 反應管中加好所有的試劑后,應盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
松果菊苷;Echinacoside 訂購|咨詢 Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 小鼠嗜性粒細胞陽離子蛋白 規(guī)格: 20mg
桂;Cinnamyl alcohol 訂購|咨詢 IL-32 ELISA Kit 大鼠白介素32 規(guī)格: 20mg
羥基茜草素;Purpurin 訂購|咨詢 Ep-CAM/CD362(Human Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人上皮細胞粘附分子 規(guī)格: 20mg
秦皮素;Esculin 訂購|咨詢 PROGR ELISA kit 大鼠孕受體 規(guī)格: 20mg
尿囊素;Allantoin 訂購|咨詢 Lens culinaris agglutinin,LCA ELISA Kit 扁豆凝集素 規(guī)格: 50mg
牡荊油;Agnuside 訂購|咨詢 Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA Kit 小鼠Qa淋巴細胞抗原2 規(guī)格: 20mg
天竺葵素;Di-tert-octyl 訂購|咨詢 Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG) ELISA Kit 兔鉤端螺旋體IgG 規(guī)格: 10mg
蓮心堿高鹽;Liensinine p 訂購|咨詢 Sam(Human soluble adhesion molecules) ELISA Kit 人可溶性粘附分子 規(guī)格: 20mg
D-(-)-奎寧;Quinic aci 訂購|咨詢 AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1) ELISA Kit 人巨噬細胞替代激活相關學因子1 規(guī)格: 20mg
角鯊;Squalene 訂購|咨詢 IL-21 ELISA Kit 大鼠白介素21 規(guī)格: 20mg
黃嘌呤;2,6-Dihydroxypur 訂購|咨詢 Ricinus communis agglutinin,RCA ELISA Kit 蓖麻凝集素 規(guī)格: 20mg
哈巴俄苷;Harpagoside 訂購|咨詢 Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 小鼠D-乳脫氫酶 規(guī)格: 20mg
甘草查爾A;Licochalcone 訂購|咨詢 F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2) ELISA Kit 兔凝血酶原段F1+2 規(guī)格: 20mg
飛蓬苷;Erigeroside 訂購|咨詢 ADM (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子腎上腺髓質素 規(guī)格: 20mg
1,3-O-二酰奎寧;Cynari 訂購|咨詢 D-LDH ELISA Kit 大鼠D-乳脫氫酶 規(guī)格: 20mg
豆腐果苷;Helicid 訂購|咨詢 VEGFR-2/sFLK-1(Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2) ELISA Kit 人可溶性內皮生長因子受體2 規(guī)格: 100mg
蒼術;Atractylon 訂購|咨詢 Pisum sativum agglutinin,PSA ELISA Kit 豌豆凝集素 規(guī)格: 20mg
臭靈丹二;Pterodondiol 訂購|咨詢 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit 小鼠孕受體 規(guī)格: 20mg
展開青霉PCR檢測試劑盒SERPINI2/PI14 蛋白酶抑制劑14抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 特價供應
CTH/CSE/Cystathionase 胱硫醚γ裂解酶抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 進口/原裝
ALAS2/ALAS-E 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit 特價促銷
AMPD3 紅細胞腺苷脫氨酶3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit 進口/原裝
AHSP/ERAF α紅細胞分化相關因子抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Proinsulin,PI ELISA Kit特價促銷
BPGM 紅細胞2,3 - 二磷酸甘油酸合成酶抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit進口/原裝
DYRK3 雙特異性酪氨酸磷酸化調節(jié)激酶3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse islet cell antibody,ICA ELISA Kit特價供應
phospho-PTPN7(Ser93) 磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Amylin ELISA Kit進口/原裝