上海一研生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學(xué)試劑盒
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒
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上海市閔行區(qū)
主營產(chǎn)品
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒 | Mycoplasma fermentansPCR | 50T |
普通PCR反應(yīng)流程:
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機(jī)
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:脫乙酰度≥95%,,粘度100-200 mpa.s
人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:脫乙酰度是80%,粘度800
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀
人白球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人抑制因子(LIF)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人抑制因子受體(LIFR)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:>98%,一水合,BR
人毒素(PT)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞
真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑(帶酶抑制劑)50次國產(chǎn)
腺英文名稱:MA891瘤
人耐奧沙利鉑耐藥株英文名稱:HCT116/L
L-O2(人正常肝細(xì)胞)毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
美味絲葚霉 Papulaspora sapidusU14-GFP(小鼠子宮頸細(xì)胞)
大鼠卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus
MDA-MB-157(人腺細(xì)胞)Acc-2(人涎腺腺樣囊性細(xì)胞)
煙曲霉 Aspergillus fumigatusQGY-7701(人肝細(xì)胞)
MGC80-3(MGC-803)人胃細(xì)胞胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液)
蘇云金芽胞桿菌幕蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. finitimus黑木耳 Auricularia auricula
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus串珠菌 Leuconostoc lactis
粘紅酵母 Rhodotorula glutinis毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
FAM59A FAM59A蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1,Tie1 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
FAM150A FAM150A蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
FAM151A FAM151A蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human angiopoietin-like protein 3,ANGPTL3 ELISA Kit 特價促銷
phospho-ODF2(Ser796) 磷酸化尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Angiogenin,ANG ELISA Kit特價促銷
FAM153B FAM153B蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Bradykinin,BK ELISA Kit特價促銷
FAM154A FAM154A蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit進(jìn)口/分裝
FAM155A FAM155A蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human angiostatin,ANG ELISA Kit進(jìn)口/分裝
FAM156A/TMEM2 跨膜蛋白29抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Hemoglobin C,HbC ELISA Kit進(jìn)口/分裝
反應(yīng)五要素:
發(fā)酵支原體PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。