準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

反應(yīng)五要素：

堪薩斯分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

使用方法 ：   

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機(jī)

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng)：   

5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽(yáng)性；整個(gè)檢測(cè)過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí)，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時(shí)禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。

人膽(CA)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRGinkgo Terpene Lactones

人彈性蛋白(ELN)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGinger Constituent Mixture

人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Gibberellic Acid

人蛋白C(PRotein C)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGentian Violet

人蛋白S(PRotein S)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGenistin

人蛋白Z(PRotein Z)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRGenistein

人蛋白二化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：>98%,FGFR抑制劑Gemfibrozil

人蛋白二化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA Kit 質(zhì)量規(guī)格：>98%Gemcitabine Hydrochloride

萋-泥氏染色液/Ziehl-Neelsen Strain細(xì)菌耐染色液10毫升×3支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人腺細(xì)胞英文名稱：MDA-MB-231

SGC7901(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

神經(jīng)降壓素(NT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Neurotensin (NT)

粘蛋白20(MUC20)重組蛋白英文名稱：Recombinant Mucin 20 (MUC20)

干擾素α4(IFNα4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Interferon Alpha 4 (IFNa4)

萬(wàn)古霉素(改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯凍干配套試劑) 規(guī)格： 10支/盒 用途： 每支添加于100ml（022212）中配成MLST

人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

BC-019(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人大隱內(nèi)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

NCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

EBTr (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人卵巢透明細(xì)胞細(xì)胞英文名稱：ES-2
堪薩斯分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒SRRM4  絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白4抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Involucrin,iNV ELISA Kit特價(jià)促銷

ADCK4  ADCK4蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

ADCK3/CABC1  伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Aspartate aminotransferase,AST ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

AGFG1  病毒復(fù)制結(jié)合蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Aspartate aminotransferase,GOT/GPT ELISA Kit進(jìn)口/原裝

AGFG2  HIV-1病毒復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human azurocidin,AZU ELISA Kit進(jìn)口/原裝

ANKRD1/CARP  心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human ferritin，F(xiàn)E ELISA Kit特價(jià)促銷

ARRDC1  抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Homocysteic acid，Hcy ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

ARRDC2  抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Ceruloplasmin,CP/CER ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)