準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

反應(yīng)五要素：

曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用方法 ：   

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項：   

5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應(yīng)分區(qū)域進行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRQuazepam CIV

大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPyrvinium Pamoate

大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPyruvic Acid

大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPyrimethamine

大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRPyrilamine Maleate

大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：0.98Pyridostigmine Bromide

大鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：0.98Pyrethrum Extract

大鼠相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%Pyrazinamide

黑曲霉 Aspergillus niger豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

人結(jié)直腸腺細(xì)胞粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis人大隱平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基

球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

人卵巢透細(xì)胞細(xì)胞人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

L-Glutamine (100X)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

SGC-7901, 人胃腺細(xì)胞系苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

NRK(大鼠腎細(xì)胞)粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

COLO 201(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)MGC80-3(人胃細(xì)胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

人直平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒PCR檢測試劑盒GTSE1/G2 and S phase expressed 1  G2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit進口/分裝

HIPK4  同源相互作用蛋白激酶4抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody，EHF IgG ELISA Kit進口/分裝

AMBRA1  自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody，EHF IgM ELISA Kit進口/分裝

IBRDC2/RNF144B  E3泛素蛋白連接酶144B抗體（環(huán)指蛋白144B）規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Anti-Ovary Antibody,AOAb ELISA Kit特價供應(yīng)

JMY  連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human anti-gliadin antibody,AGA ELISA Kit特價供應(yīng)

LRDD/PIDD  富含亮氨酸重復(fù)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit特價促銷

MCG10  RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human intrinsic factor antibody,IFA ELISA Kit進口/原裝

NME6/IPIA ALPHA  P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA Kit進口/分裝