耐甲氧西林金黃色葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒
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上海一研生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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用途范圍 僅用于科研
純度 98%%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 上海一研
規(guī)格 50T
貨號(hào) EY00P777
是否進(jìn)口
商品介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

            產(chǎn)品名稱(chēng)

               英文名稱(chēng)

                規(guī)格

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒

MethicillinResistant Staphylococcus aureus( MRSA)PCR

                  50T

普通PCR反應(yīng)流程:

 

準(zhǔn)備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                   微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                   毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份

使用方法    

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1)PCR儀

2)PCR反應(yīng)管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機(jī)

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng):   

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說(shuō)話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性;整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過(guò)多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶(hù)需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。

大鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:INDPenicillin G Potassium

大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BSPenicillin G Benzathine

大鼠生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BSPenicillamine Disulfide

大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:0.9Penicillamine

大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:0.95Penbutolol Sulfate

大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:>95%Peanut Oil (AS)

大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:BSP-Chloroaniline

大鼠(EPI)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BSParticle Count Set

金橫裂鏈霉菌 Streptomyces aureosegmentosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe綠色木霉 Trichoderma viride

J82(人膀胱細(xì)胞)青銅小單胞菌 Micromonospora chalcea

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumMEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

皺褶假絲酵母 Candida rugosa人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna近平滑假絲酵母 Candida parapsilosis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti泡盛曲霉 Aspergillus awamori

蘇云金芽胞桿菌托馬諾夫亞種 Bacillus thuringiensis subsp. toumanoffii纖維素鏈霉菌 Streptomyces cellulose

粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe奇異變形桿菌 Proteus mirabilis

SW626(人卵巢細(xì)胞)巨大芽胞桿菌 Bacillus megaterium

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
WAPL  EBV核蛋白2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human Leishimaria antibody ELISA Kit進(jìn)口/分裝

CAPD3/hCAP-D3  濃縮素2復(fù)合亞基D3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

AMSH  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)

ASB3  錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody,GM-CSF Ab ELISA Kit 進(jìn)口/原裝

EIF2C1/Ago1  真核翻譯起始因子2C1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

Anillin  胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human granulocyte specific antinuclear antibody,GS-ANA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

BIN3  細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)

CCDC11  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱(chēng):Human Streptokinase,SK ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
反應(yīng)五要素:

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

 


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