產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測(cè)試劑盒
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上海一研生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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用途范圍 僅用于科研
純度 98%%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 上海一研
規(guī)格 50T
貨號(hào) EY00P709
是否進(jìn)口
商品介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

            產(chǎn)品名稱

               英文名稱

                規(guī)格

產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測(cè)試劑盒

Klebsiella oxytocaPCR

                  50T

普通PCR反應(yīng)流程:

 

準(zhǔn)備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                   微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                   毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份

使用方法    

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1)PCR儀

2)PCR反應(yīng)管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機(jī)

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng):   

產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測(cè)試劑盒5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說(shuō)話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性;整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過(guò)多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。

人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:95%,美國(guó)進(jìn)口原裝Daphnetin

人腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進(jìn)分Daphnetin

人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)原裝進(jìn)口7-15 units/mg,來(lái)源于地衣芽孢桿菌Kavain

人腸病毒(Enterovirus)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Stepholidine

人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品1,8-Dihydroxyanthraquinone

人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>90%,羅氏分包10-Deacetylbaccatine III

人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR20(S)-Ginsenoside F1(3b,6a,12b)-3,6,12-Trihydroxydammar-24-ene-20-yl beta-D-glucopyranoside

人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格:30 units/mg20(S)-Ginsenoside-F2

大鼠肝星形細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

RAG(小鼠腎腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

人肝星形細(xì)胞英文名稱:LX-2

Hela S3(人宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂/Lecithin Tween 80 Nutrient Agar妝品檢驗(yàn)中細(xì)菌計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

乙酰紅瓊脂/Acetamide Agar250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

16HBE(人上樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

吳茱萸堿規(guī)格:20mg/支;98%

小鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基球菌霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. hordniae

串珠菌 Leuconostoc lactis人喉表皮細(xì)胞

OVCAR-3(人卵巢細(xì)胞)解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica

馬松(Masson)三色法染色試劑盒人腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基
MAGEA5  相關(guān)抗原5抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit進(jìn)口/原裝

MAGEB1  相關(guān)抗原B1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Cholic acid,CA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

MAGEB2  相關(guān)抗原B2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Elastin,ELN ELISA Kit進(jìn)口/原裝

MAGEB3  相關(guān)抗原B3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Elastase ELISA Kit進(jìn)口/原裝

MAGEB4  相關(guān)抗原B4抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Protein C ELISA Kit進(jìn)口/原裝

MAGEB6  相關(guān)抗原B6抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Protein S ELISA Kit進(jìn)口/原裝

MAGEC1  相關(guān)抗原C1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Protein Z ELISA Kit進(jìn)口/分裝

MAGEE1/MAGEC2  相關(guān)抗原C2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISA Kit特價(jià)促銷
反應(yīng)五要素:

產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

 


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