單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒
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商品參數(shù)
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用途范圍 僅用于科研
純度 98%%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 上海一研
規(guī)格 50T
貨號(hào) EY00P738
是否進(jìn)口
商品介紹

反應(yīng)五要素:
單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

準(zhǔn)備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                   微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

            產(chǎn)品名稱

               英文名稱

                規(guī)格

單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒

Listeria monocytogenesPCR

                  50T

普通PCR反應(yīng)流程:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

使用方法    

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1)PCR儀

2)PCR反應(yīng)管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機(jī)

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng):   

5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個(gè)檢測(cè)過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。

c-fos ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTriacetin

CD4分子(CD4)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%Trenbolone CIII

CD30分子(CD30)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRTrehalose

CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,一水Trazodone Hydrochloride

CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTransplatin

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分,Sigma T4376Tranexamic Acid

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRTrandolapril

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTorsemide

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桿菌屬 Lactobacillus sp.T84(人腺肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)

COLO全細(xì)胞裂解液釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

黃硬皮馬勃 Scleroderma flavidum豬腎細(xì)胞

毛霉屬 Mucor sp.地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

人角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

蓋囊側(cè)耳 Pleurotus cystidiosus中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

異常漢遜酵母 Hansenula anomala人結(jié)直腸腺細(xì)胞

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蘋果鏈格孢 Alternaria maliMDA-MB-231, 人腺細(xì)胞

小鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒CDC2L6  細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激酶6抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit 特價(jià)促銷

Hrk/BCL2 interacting protein  BCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝

IKB zeta/MAIL protein  KB抑制蛋白激酶Ζ抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)

NME5/IPIA beta  P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA Kit 特價(jià)促銷

Noxa  Noxa蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)

phospho-RKIP (Ser 153)  磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit特價(jià)促銷

BMP11  骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

RERE  肌萎縮相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3,TIMP-3 ELISA Kit特價(jià)促銷

 


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