準備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應流程：

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

反應五要素：

高地病毒PCR檢測試劑盒參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用方法 ：   

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項：   

5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。

5.4 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。

5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

塞隆骨 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121332200502 LAspartic acid

廣棗 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121334200401 LCysteine hydrochloride，anhydrous

鷓鴣菜 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121335200401 Carbocistein;SCarboxymethylLcysteine

膽木 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121336200401 SBenzylLcysteine

珊瑚姜 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121337200401 LGlutamic acid hydrochloride

草烏 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121338200401 NωNitroLarginine

黑芝麻 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121339200401 NalphaBenzoylLarginine

山楂葉(山里紅) 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121340200401 LAsparagine Anhydrous

黃精（黃精） 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121341200402 LAsparagine anhydrous

竹葉柴胡 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121343200401 N'TritylLasparagine

綠萍 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121344200401 LAspartic Acid 1Benzyl Ester

艾葉 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121345200401 LAspartic acid 1methyl ester

鴨膽子 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121346200401 LAspartic acid βmethyl ester hydrochloride

杏葉防風 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121347200401 SMethylLcysteine

五靈脂 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121348200501 STritylLcysteine

水防風 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 121349200401 LGlutamic Acid 1Methyl Ester
高地病毒PCR檢測試劑盒Tissue factor/CD142/F3  組織因子抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 特價促銷

Galc  半乳糖腦苷脂酶抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA Kit進口/原裝

AEV polyprotein  禽腦脊髓炎病毒AEV抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA Kit特價促銷

EBNA 3B  EB病毒核抗原-3B抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit 進口/分裝

ADFP  脂肪組織分化相關蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit進口/原裝

LMP2A  EB病毒LMP-2A蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit進口/分裝

ADAM2  去整合素樣金屬蛋白酶2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 3,TIMP-3 ELISA Kit進口/原裝

MLCK  肌球蛋白輕鏈激酶抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 4,TIMP-4 ELISA Kit特價促銷