上海一研生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學(xué)試劑盒
同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR檢測試劑盒
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上海市閔行區(qū)
主營產(chǎn)品
反應(yīng)五要素:
同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR檢測試劑盒 | Equine Viral Arteritis Virus()RTPCR | 50T |
普通PCR反應(yīng)流程:
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機(jī)
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
左旋標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 87694 Ciprofloxacin
?;菢?biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 107357 Cinoxacin
他唑巴坦標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 89786049 Cimetidine Hydrochloride
他唑巴坦相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 118175114 Cimetidine
標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 846504 Cilostazol
替米沙坦標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 144701484 Cilastatin Ammonium Salt
替米沙坦相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 152628029 Ciclopirox Related Compound B
替米沙坦相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 1026353207 Ciclopirox Related Compound A
鹽特拉唑嗪標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 70024407 Ciclopirox Olamine
特拉唑嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Ciclopirox
特拉唑嗪相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Chromium Picolinate
特拉唑嗪相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Choline Chloride
鹽特比萘芬標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 78628805 Choline Bitartrate
特布他林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: Cholic Acid (AS)
替莫唑標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 85622931 Cholestyramine Resin
替莫唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷 規(guī)格: 24316914 Cholesteryl Caprylate
同馬動脈炎病毒馬病毒性動脈炎病毒PCR檢測試劑盒成纖維細(xì)胞生長因子3(FGF3)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Stevioside 25mg
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Gambogic acid 1mg
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Neogambogic acid 1mg
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Sinensetin 1mg
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Heterophyllin B 1mg
成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Orcinolglucoside 1mg
成纖維細(xì)胞生長因子6(FGF6)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Santalol 1mg
成纖維細(xì)胞生長因子6(FGF6)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Topotecan 7 x 10mg